克洛生是建明工业开发的专门用于控制畜禽肠道梭菌,维持肠道平衡的益生菌,主要成分是获得专利的枯草芽孢杆菌PB6(Bacillius subtilis PB6)。克洛生进入动物肠道后会迅速繁殖,产生表面素 (Surfactin) A和表面素B,这两种分子体外实验被证明能有效抑制产气荚膜梭菌生长,克洛生在多个国家被批准作为饲料添加剂用于梭菌性疾病的预防。本研究旨在通过动物实验来验证克洛生在我国猪体内抑制梭菌的能力,同时了解母猪梭菌感染情况,为无抗健康养殖场提供新的梭菌防控选择方案。
试验方法
试验最先在没有使用克洛生的情况下检测怀孕母猪和哺乳母猪粪便中梭菌的含量,检测结束后将克洛生拌料饲喂试验母猪,添加剂量为200克/吨。在饲喂含克洛生饲料12天后分别采集所有试验母猪的粪便,检测梭菌的含量。
梭菌含量检测按照试剂盒说明书进行操作,在第4小时读一次结果,第5小时读一次结果用于判定母猪梭菌感染情况
如果粪便中梭菌含量越高,在培养的过程中相同时间繁殖出的产气荚膜梭菌就越多,代谢产生的硫化氢也更多,因此生成的硫化亚铁也会相应增加,同理产生相同量黑色沉淀菌含量越高所需的时间也就越短。因此可以根据培养过程中开始产生黑色的时间以及量来判定粪便中产气荚膜梭菌的含量
试验结果
通过变色情况初步判断母猪感染梭菌的情况十分严重,因此所有母猪使用添加克洛生200克/吨的饲料进行饲喂,从2013年5月14日开始到2013年5月25日,一共12天。采集相同怀孕母猪和哺乳母猪粪便检查梭菌含量。图1-C、1-D为饲喂克洛生后20头哺乳母猪4小时梭菌检测显色结果,图2-C、2-D为饲喂克洛生后20头哺乳母猪5小时梭菌检测显色结果,图3-B、4-B分别为为饲喂克洛生后5头怀孕母猪4小时和5小时梭菌检查显色结果。从图上可以看出在饲喂克洛生后试管变黑的数量和程度明显下降。
分析和讨论
中国猪场母猪携带梭菌的情况并不清楚,本研究利用梭菌检测试剂盒对猪场梭菌含量进行调查。被检测的25头母猪中有18头梭菌超标,严重感染的怀孕母猪和哺乳母猪分别达到75%和60%,提示母猪携带梭菌较为普遍,对母猪感染情况进行统计(表2所示)。在使用克洛生12天后再次检测可以看出严重感染的怀孕母猪和哺乳母猪从总数11头减少到2头,总计减少9头,改善率81.3%。轻度感染母猪由7头减少到3头,减少4头,改善率达到57.1%。
改善最明显的是哺乳母猪,使用克洛生后3头母猪全部从重度感染变为正常,改善率达到100%。其中轻度感染母猪变化看上去不如重度感染母猪变化明显,可能是因为原来重度感染母猪,使用克洛生后从重度感染变成了轻度感染,掩盖了克洛生对轻度感染梭菌母猪的治疗效果。饲喂含克洛生200克/吨饲料12天后所有母猪梭菌超标情况由18头变为5头,有13头母猪恢复正常,治疗有效率达到72%。该实验结果证明克洛生可以有效减少猪肠道中的梭菌,改善动物健康状态,这与国外发表的文章结果一致,也与克洛生体外抑制梭菌的结果一致。
结论
通过母猪粪便梭菌检测表明母猪普遍携带梭菌,且大多数母猪梭菌含量超标,是仔猪梭菌性疾病的主要来源。克洛生添加到饲料中能显著降低梭菌在猪肠道内的含量,保证猪群健康。